AEEA-AEEA Hydrophilic Linker

تجمع ADC و پاکسازی سریع موانع اصلی هستند که منجر به ایمنی زایی بالا، کارایی کم و شکست دسته ای می شوند. معرفی پیوندهای آبدوست (حاوی واحدهای PEG مانند AEEA-AEEA) یک استراتژی موثر برای رسیدگی به این دو موضوع است.
The mechanism for reducing aggregation: The driving force for ADC aggregation is mainly the mutual attraction between hydrophobic drug molecules. When DAR>4, multiple drug molecules concentrate on the surface of the antibody, forming a "hydrophobic plaque". Hydrophilic PEG linkers, such as AEEA-AEEA, prevent aggregation through the following methods: ① Hydration layer repulsion: PEG chains bind a large number of water molecules, and each EO unit binds 2-3 H ₂ O, forming a hydration layer with a thickness of about 0.5-1 nm/unit. The total thickness of the hydration layer contributed by two AEEA units (four EO) is about 2 nm, which is sufficient to form an effective barrier between drug molecules (repulsive energy~3-5 kT, far greater than hydrophobic attraction~1-2 kT). ② Conformal entropy repulsion: The flexible conformation of PEG chains reduces their entropy during compression, generating entropy elastic repulsion and further resisting aggregation. The experiment showed that using AEEA-AEEA ADC (DAR=6) at a concentration of 5 mg/mL, the aggregation rate (SEC-HPLC detection of HMW aggregates) was less than 3%; The control without PEG linker (DAR=4) had aggregates>15%.
مکانیسم تأخیر در پاکسازی: گیرنده‌های پاکسازی روی سلول‌های کوپفر و سلول‌های اندوتلیال سینوسی در کبد، مانند گیرنده SR{0}}B1 و دامنه‌های خاص آنتی‌بادی شناسایی گیرنده مانوز MR. بارگذاری داروی آبگریز بر روی سطح آنتی بادی ها، نواحی آبگریز را در معرض دید قرار می دهد و میل به پاکسازی گیرنده ها را افزایش می دهد. زنجیره‌های PEG آب‌دوست AEEA{4}}AEEA می‌توانند به طور موثری این مناطق آبگریز را "پوشانده" کنند. تحقیقات نشان داده است که ADC با استفاده از پیوندهای PEG، جذب کبد را تا 50-60% در مقایسه با گروه کنترل غیر PEG کاهش می‌دهد و نرخ کلیرانس پلاسما از 12 میلی‌لیتر/ساعت/کیلوگرم به 6 میلی‌لیتر/ساعت/کیلوگرم کاهش می‌یابد. نیمه عمر چرخه از 3 روز به 7 روز در مدل موش افزایش یافت. علاوه بر این، آب دوستی خطر اتصال به آنتی بادی های ضد PEG را نیز کاهش می دهد. هنگامی که طول PEG متوسط ​​باشد، ایمنی زایی دایمر AEEA بسیار کمتر از PEG با زنجیره بلند مانند PEG2000 است.
هم افزایی فرمول: پیوندهای هیدروفیل نیز توسعه فرمولاسیون را ساده می کنند - بدون نیاز به غلظت های بالای سورفکتانت ها، پایداری را حفظ می کنند. در فرمول‌های منجمد{2}}خشک شده، تجمع ADC حاوی AEEA-AEEA پس از بازسازی کمتر از 1٪ است، بسیار فراتر از استاندارد داروسازی (<5%). Therefore, hydrophilic PEG linkers have become a "standard" design element for ADC stability and long cycling.